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医学实验手册：实验动物安死术

发布时间：2020-05-20 17:08     文章来源：未知     作者：尊龙凯时 - 人生就是搏!生物

 

​医学实验手册

 

普略医学（尊龙凯时 - 人生就是搏!生物）成立于2011年，是国内较早成立的转化医学研究技术服务公司。公司拥有八大转化医学研究技术平台，数十个技术实验室全部按国家或国际一流标准建设，仪器配置齐全。普略医学根据多年实验经验推出医学实验手册，助力基础医学科研！上期我们讲了动物血液采集，这一期我们来看看实验动物安死术~~

 

安死术（euthanasia）是指公众认可的、以人道主义的方法处死实验动物的过程，即达到没有惊恐及焦虑，安静地、无痛苦地死亡。

 

安死术标准

 

1、死亡时没有惊恐、疼痛表现。

2、使动物在最短时间内失去意识迅速死亡。

3、方法可靠且可重复。

4、保证操作人员安全。

5、采取的方法要与研究要求和目的一致。

6、对观察者和操作者的情绪影响最小。

7、对环境污染的影响最小。

8、需要的机械设备简单、价廉、易操作。

9、处死动物的地点应远离动物房并隔开。
此外还需注意通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断，确认实验动物已经死亡，同时妥善处理好尸体。
 

安死术常用方法

 

一、吸入麻醉法
常用的麻醉剂为乙醚，主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。方法是将浸润乙醚的棉花或纱布放入密闭的容器内，将动物放入，数分钟后动物因吸入过量麻醉剂导致中枢神经过度抑制而死亡。
优点：不需要静脉注射，操作简便。
缺点：易燃易爆，具有黏膜刺激性，应配置合适的排气系统；麻醉兴奋期有时会出现动物挣扎的现象；处死豚鼠时，肺和脑会出现小出血点，在病理解剖时应注意。
二、颈椎脱位法
主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。其方法是右手抓住鼠尾，将其放在实验台上，用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，动物立即死亡。
优点：脑干与脊髓分离时动物感觉不到痛的刺激，只破坏脊髓，体内脏器完整无损，适于采样时使用。
缺点：施力不当，特别是施力不够时，动物不能立即死亡，会造成动物疼痛以及肺、脾、肾等脏器充血和淤血。
三、击打头盖骨法
主要用于豚鼠、兔等啮齿类动物。方法是用木锤等硬物重击动物头部使大脑中枢遭到破坏，动物痉挛并死亡。
优点：简单易行，操作得当能使动物痛觉立即全部消失。
缺点：操作不当仅会造成动物部分痛觉丧失；会引起脑损伤痉挛、鼻出血、颈部气管或肺内出血、个别内脏破裂等。
四、断头法
主要用于大、小鼠等小型啮齿类动物。方法是用右手握住大鼠头部，左手握住背部，露出颈部，助手用剪刀在动物颈部垂直将头剪断，动物脑与脊髓断离且大量出血而死亡。
优点：使动物立即丧失眨眼反射，对组织和血液的生理学（酶）变化影响最小。
缺点：操作不当仅会造成动物部分痛觉丧失；血液可灌入气管及肺组织，影响肺重及组织学镜检，有时可损伤甲状腺。
五、空气栓塞法
常用于犬、猫、兔、豚鼠。向动物静脉内注入一定量的空气，可在右心随着心脏的跳动与血液相混使血液成泡沫状，并随血液循环到全身。进入肺动脉，可梗阻其分支，进入心脏冠状动脉，可造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快死亡。一般兔、猫等由静脉注入20～40ml，犬由前肢或后肢皮下静脉注入80～150ml。
优点：操作简便。
缺点：会造成动物抽搐、角弓反张，发出痛苦呻吟；只能用于深度麻醉的动物，不能单独使用。
六、过量注射麻醉剂法
用于各种动物。可经静脉、腹腔、肌内、皮下和心内等途径注射大量的麻醉剂来达到迅速致死的目的，其中静脉注射最迅速有效。最常用的麻醉药是盐酸氯胺酮和水合氯醛。
优点：价廉，作用迅速，动物无不适感。
缺点：浓度过高有局部刺激性
七、急性失血法
大鼠和小鼠可采用眼眶动脉和静脉急性大量失血方法立即死亡。家兔可采用颈动脉急性大量失血方法立即死亡。犬可先轻度麻醉（每千克体重静脉注射硫喷妥钠20～30mg即快速入睡），暴露股三角区，用锋利的杀犬刀在股三角区做一个约10cm的横切口，把股动、静脉全切断，立即喷出血液，用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块，同时不断地用自来水冲洗流血，使切口处保持畅通，动物在3～5分钟内即可死亡。
优点：对脏器无损伤，适用于活杀采集病理切片标本。
缺点：需要受过培训、技术熟练的人员来操作，即便如此动物仍会受到很大的痛苦，仅适用于麻醉状态下的动物；易造成动物脏器贫血，影响脏器称重。
八、开放性气胸致死法
将动物开胸，使胸膜腔的压力与大气压力相等，肺脏受大气压缩发生肺萎陷，纵隔摆动，动物窒息而死。
优点：操作方便。
缺点：动物的痛觉不会立即消失；不能单独使用，要在动物麻醉状态下使用。
九、化学致死法
1、将动物装笼后放入透明塑料袋内，封好后慢慢充入二氧化碳，动物很快死亡。
2、静脉内注入一定量的氯化钾溶液，使动物心肌失去收缩能力，心脏急性扩张，致心脏迟缓性停跳而死亡。家兔一般耳缘静脉注入5～10ml，犬一般前肢或后肢下静脉注入20～30ml。
3、静脉注入福尔马林溶液使血液内蛋白凝固，动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死，犬一般注射20mL。
优点：价廉，动物无不适感。
缺点：注射的速度要快，剂量要大到足以使动物的心博迅速停止；福尔马林毒性较大，实验人员要做好自身的防护；不能单独使用，要在动物深度麻醉后再使用。
十、脑脊髓刺毁法
主要用于蛙、蟾蜍等两栖动物和爬行动物。具体的方法是用左手的拇指压住蛙头，右手持金属探针由头前端沿线向尾方刺触，触及凹陷处（枕骨大孔），将探针由凹陷处垂直刺入，再转向头侧，向前探入颅腔，然后向各方搅动，捣毁脑组织。脑组织捣毁后将探针退出，再由枕骨大孔剌入，并转向尾侧，与脊柱平行刺入椎管破坏脊髓。动物若四肢肌肉完全松弛，则脑和脊髓被完全破坏。
优点：操作得当能使动物立即丧失全部痛觉。
缺点：需要专业培训，了解蛙的骨骼结构；操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验人员眼内，如被射入，立即用生理盐水冲洗眼睛。

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